Browsing by Author "Vidal Vera, Frank Willian"

Now showing 1 - 1 of 1
  • Thumbnail Image
    ItemOpen Access
    Protocolos de extraccion de ADN en sangre de cerdos criollos en Quevedo.
    (Quevedo-Ecuador, 2015) Vidal Vera, Frank Willian; Cevallos Falquez, Orly Fernando
    Se planteó una investigación cuyo objetivo fue realizar un protocolo de extracción de ADN en cerdos criollos nacionales, con un alto grado de pureza y concentración, para la obtención de Marcadores Moleculares que permita conocer su potencialidad en la producción. La extracción de ADN a partir de sangre implica la utilización de metodologías complejas debido a problemas como la degradación, las cantidades limitantes de ADN y la presencia de sustancias inhibidoras que pueden ser co-extraídas con el ADN. En el Laboratorio de Biotecnología de la Universidad Técnica Estatal de Quevedo se ha dificultado la estandarización de un protocolo útil para extracción y análisis de ADN de alta calidad y cantidad. Con el fin de encontrar un método que proporcione las mejores condiciones de extracción, purificación y amplificación de ADN, se realizó la comparación de dos metodologías de extracción de ADN a partir de sangre periférica, entre ellas el método de Salting out, y el método TENs utilizado actualmente en el laboratorio, permitieron la obtención de ADN de calidad y pureza necesarias para la amplificación mediante PCR a partir de volúmenes de sangre, con un volumen mínimo 100 µL de sangre de partida. Por otro lado se emplearon las metodologías de electroforesis y espectrofotometría para la evaluación de la calidad y cantidad de ADN extraído, logrando determinar el mejor método de extracción de ADN el T5. Como conclusión mediante las dos metodologías empleadas para la cuantificación de ADN, se determinó que el Salting out, el cual se basó en la extracción de ADN con fenol, cloroformo y alcohol isoamílico, fue el mejor método de extracción de ADN, logrando obtener buenos rendimientos y calidad. Palabras clave: Muestras de sangre; Extracción ADN; salting-out; PCR, TENs.