Determinar la prevalencia de Mycobacterium tuberculosis) con la técnica de lamp en el Camal Municipal del Canton Quevedo.
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Date
2019
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Publisher
Quevedo-Ecuador
Abstract
La técnica de LAMP (amplificación isotérmica mediada por un lazo) es de alta sensibilidad y especificidad bajo condiciones isotérmicas (10 – 80ºC). El objetivo general de esta investigación fue calcular la prevalencia de tuberculosis bovina mediante la técnica de LAMP, en el camal municipal del cantón Quevedo, situado en la provincia de Los Ríos. Para este estudio se tomaron 400 muestras de bovinos que fueron analizados durante ocho semanas luego trasladadas al Laboratorio de Biología Molecular de la Universidad Técnica Estatal de Quevedo, para la extracción de ADN aplicando el protocolo de TENs y para observar su calidad y cantidad de ADN se lo colocó en un gel de agarosa al 1% y visualizado en el transiluminador. Para aplicar la técnica de LAMP se utilizaron 2 juegos de primers y la enzima Betahina. De las 400 muestras tomadas 214 animales fueron positivas a Mycobacterium tuberculosis bovina (53,5%) y 186 (46,5%) fueron negativas; de esto 192 (48 animales además se pudo establecer que 48 de los ejemplares analizados eran machos y el 52% hembras, la raza Brahman encabezó la lista con el 27% seguido de la raza Holstein con 72 (18%) de prevalencia. Se determinó que al realizar el análisis económico mediante el protocolo de TENs y LAMP cada muestra reflejó un valor de $1,81 en conclusión se considera la eficacia y el beneficio de la técnica LAMP para la extracción de ADN por su alta especificidad y rapidez bajo condiciones isotérmicas que no requiere reactivos y equipos sofisticados como termocicladores ya que puede ser efectuado mediante baño María.
Palabras claves: Prevalencia, tubercu1osis bovina, protocolo TENs, ADN.
Description
The LAMP isothermal amplification technique was based on extracting DNA through the TENs protocol from lung tissue (lymph nodes) of slaughtered cattle, to determine the prevalence of bovine tuberculosis. The general objective of this investigation was to calculate the prevalence of bovine tuberculosis using the isothermal amplification technique in the municipal channel of the Quevedo canton, located in the province of Los Ríos. To this effect, 400 samples were taken from cattle that were analyzed during eight weeks in the facilities of the Molecular Biology Laboratory of the State Technical University of Quevedo, which were placed in the electrophoresis chamber and the electrodes were connected to the power source. at 100 volts per hour to finally observe the results in the documentary photo: 214 samples positive to bovine tuberculosis equivalent to 53.5% and 186 negative samples reflecting a prevalence of 46.5%; It was also possible to establish that 48 of the analyzed specimens were males and 52% females, the Brahman race topped the list with 27% followed by the Holstein breed with 72 (18%) prevalence. It was determined that when performing the economic analysis using the TENs and LAMP protocol, each sample showed a value of $ 1.81. In conclusion, the effectiveness and the benefit of the LAMP technique for the extraction of DNA due to its high specificity and speed under conditions Isothermal that does not require reagents and sophisticated equipment such as thermal cycler since it can be done by means of a water bath.
Key words: Prevalence, bovine tuberculosis, TENs protocol, DNA
Keywords
Prevalencia, Camal, tecnica
Citation
Sánchez Vélez, Gisella Xiomara. Determinar la prevalencia de Mycobacterium tuberculosis) con la técnica de lamp en el Camal Municipal del Cantón Quevedo. Quevedo. UTEQ. 63p