Desarrollo de protocolo de propagación in vitro para Cedro (Cedrela odorata L.).
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Date
2011
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Publisher
Quevedo : UTEQ
Abstract
Por el alto valor comercial del cedro (Cedrela odorata L.) ha llevado a taladores ilegales a extraer en forma masiva deforestando bosques poniendo en peligro la extinción de esta especie forestal, debido que en nuestro País no existen programas de mejora y conservación del cedro por tal razón nos ha motivado para realizar la presente investigación utilizando la biotecnología como una herramienta factible en cuanto a la propagación, considerando aspectos fenológicos y así contribuir al medio ambiente, especialmente al campo forestal.
En la actualidad la biotecnología es una ayuda de mucha importancia para mitigar los problemas con especies en peligro de extinción.
Esta investigación se la realizó en el laboratorio de biotecnología de la UNIVERSIDAD TÉCNICA ESTATAL DE QUEVEDO, ubicado en la provincia de los Ríos, cantón Quevedo.
El objetivo de esta investigación fue establecer la metodología para la multiplicación in vitro vía organogénesis directa del cedro, así como determinar el mejor protocolo de desinfección de los explantes para la fase de establecimiento, encontrar la mejores concentraciones de hormonas del tipo citoquininas y auxinas, tanto para la proliferación de brotes, y enraizamiento respectivamente.
Los explantes fueron extraídos de yemas axilares de plantas jóvenes que se encuentran ubicadas en el invernadero de la UTEQ previamente seleccionadas por sus características fenológicas para luego ser establecidas, por medios de procesos físicos y después ser llevados a sus respectivos medios de cultivo.
En la fase de establecimiento se realizaron dos ensayos previos a la fase de multiplicación. En el primero se utilizó hipoclorito de calcio con las concentraciones de 2 y 2,5 g L-1 más gentamicina en una concentración de 0 y 10 mg L-1 en el medio de cultivo simple (Murashige y Skoog 1962).
En el segundo se utilizó bicloruro de mercurio al 25% en sus concentraciones con un tiempo de inmersión de los explantes de 8 y 15 minutos más gentamicina en una concentración de 0 y 10 mg L-1. Los explantes fueron sembrados en el mismo medio del ensayo anterior.
El mejor tratamiento a los 21 días de haber sembrado los explantes en el medio de cultivo simple fue con la concentración de bicloruro de mercurio obteniendo un 100% de sobrevivencia libres de contaminación para ser transferido a la fase de multiplicación.
En la fase de multiplicación se utilizó el medio de cultivo (Murashige y Skoog 1962).
Más la auxina BAP con diferentes concentraciones (0.25, 0.50, 0.75, 1 mg L-1) donde obtuvimos el mayor número de brotes por explante, longitud y supervivencia en la concentración de 0.50 mgL-1BAP.
Para la fase de enraizamiento se utilizó el medio de cultivo WPM con los nitratos al 50% más 30 g L-1 de sacarosa. Transferimos a este medio los explantes procedentes de la fase anterior que contenía auxinas con sus respectivas concentraciones tanto para AIB (1 y 1,5 mg L-1) y ANA (0,5 y 1 mg L-1) donde se evaluó la inducción de callos, longitud de raíz y número de raíces por explante, a través de la interacción de las auxinas 1 mg L-1AIB + 0,5 mg L-1ANA.
Description
Because of the high commercial value of the cedar (Cedrela odorata L.) has led to illegal loggers to extract massively deforested forests, threatening the extinction of this tree species, because in our country there are no programs for improvement and conservation of the cedar for that reason has motivated us to conduct this research using biotechnology as a possible tool in the spread, considering phenological aspects and contribute to the environment, especially in forestry.
Today biotechnology is a very important help to mitigate the problems with endangered species.
This research is performed in the laboratory of biotechnology QUEVEDO State Technical University, located in the province of Los Rios, Quevedo Canton.
The objective of this research was to establish the methodology for in vitro propagation via direct organogenesis cedar, as well as determine the best protocol for disinfection of explants for the establishment phase, finding the best concentrations of both hormones for shoot proliferation and rooting.
The explants were extracted from axillaries buds of young plants which are located in the greenhouse of the previously selected by UTEQ phenological characteristics and then be established by means of physical processes and then be taken to their respective culture media.
In the establishment phase two trials were conducted prior to the multiplication phase. The first used calcium hypochlorite with concentrations of 2 and 2.5 g L-1 plus gentamicin at a concentration of 0 and 10 mg L-1 in the simple culture medium (Murashige and Skoog 1962).
In the second bichloride of mercury was used to 25% in their concentrations with a time of immersion of the explants 8 and 15 minutes plus gentamicin at a concentration of 0 and 10 mg L-1. The explants were planted in the same half of the previous test.
The best treatment at 21 days after seeding the explants in the culture medium was simple with the concentration of mercury bichloride of obtaining a 100% survival free of contamination to be transferred to the multiplication phase.
In the multiplication phase, we used the culture medium (Murashige and Skoog 1962) Auxin plus BAP at different concentrations (0.25, 0.50, 0.75, 1 mg L-1) where we got the highest number of shoots per explants, length and survival in the concentration BAP 0.50 mg L-1.
For the rooting phase was used WPM medium with nitrates 50% plus 30 g L-1 sucrose. We transferred to this medium of explants from the previous phase containing their respective auxins both AIB concentrations (1 and 1.5 mg L-1) and ANA (0.5 and 1 mg L-1) that evaluate induction callus, root length and number of roots per explant, through the interaction of auxin 1 mg L-1AIB + 0.5 mg L-1ANA.
Keywords
Desarrollo de protocolo, Propagación in vitro, Cedro (Cedrela odorata L.)
Citation
Paladinez Coello, Eduardo Vinicio. (2011). Desarrollo de protocolo de propagación in vitro para Cedro (Cedrela odorata L.). Quevedo. UTEQ. 81 p.